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無外泌體血清滅活工藝流程

更新時間:2021-01-26 點擊量:1509
   外泌體特指直徑在30-100nm的盤狀囊泡,其內(nèi)部包裹了多種蛋白質(zhì)、mRNA、non-coding RNA等分子。外泌體主要來源于細胞內(nèi)多囊泡體,經(jīng)多囊泡體外膜與細胞膜融合后釋放到胞外基質(zhì)中。無外泌體血由細胞分泌釋放后,通過個種體液在體內(nèi)傳播,被靶細胞攝入后,釋放內(nèi)部的生物分子,參與細胞間的通訊,調(diào)節(jié)細胞功能。
  就目前而言幾乎所有類型的細胞都可以產(chǎn)生并釋放外泌體,不同的生物體液(血液、尿液、腦脊液、唾液、乳汁、腹水)中都發(fā)現(xiàn)有大量外泌體存在,外泌體由細胞分泌釋放后,通過個種體液在體內(nèi)傳播,被靶細胞攝入后,釋放內(nèi)部的生物分子,參與細胞間的通訊,調(diào)節(jié)細胞功能。
  無外泌體血清滅活工藝流程:
  1.選用與血清瓶同規(guī)格的對照瓶一個
  2.對照瓶內(nèi)放入與血清等體積的水
  3.溫度預試:對照瓶內(nèi)插入2—3支經(jīng)挑選的溫度計(保證測試溫度的準確性),放入水浴箱中,接通電源,調(diào)節(jié)溫度控制鈕,使水浴箱溫度所示溫度保持在56℃。
  4.無外泌體血清滅活血清瓶與帶溫度計的對照瓶一齊放入水浴箱中,待溫度計所示溫度上升至56℃時,定時30分鐘。
  5.大瓶無外泌體血清滅活后,進行分裝
  6.保存:分裝后,無外泌體血清抽樣做無菌試驗,-20~-70℃保存。
  無外泌體血清的熱滅活是很多培養(yǎng)者感興趣的話題,價格不菲的無外泌體血清中含有諸如生長因子,維生素,氨基酸等珍貴物質(zhì),而將它們置于50℃以上的溫度長達30分鐘是*沒有必要的。