在細胞體外培養(yǎng)工作中，為了達到長期保存細胞的生物活性的目的，須將細胞進行冷凍保存，并在實驗需要的時候?qū)⑵渲匦聫?fù)蘇和培養(yǎng)。目前，細胞凍存常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法，主要采用添加適量保護劑使細胞緩慢降溫至zhi定溫度范圍，從而到達保護細胞的目的。

　　即用型無血清非程序凍存液是技術(shù)團隊在長期的細胞研究過程中針對細胞的凍存和復(fù)蘇不斷優(yōu)化實驗條件，面向數(shù)百種細胞研發(fā)出的專用凍存液產(chǎn)品。

　　該產(chǎn)品添加了細胞沉降穩(wěn)定劑，可延緩細胞在凍存過程中的沉降速率，防止細胞互相擠壓，影響細胞凍存效果。另外，添加了細胞膜保護劑、滲透性細胞膜內(nèi)保護劑、非滲透性細胞保護劑等多種冷凍保護劑，這些成分在溶液中同水分子結(jié)合，發(fā)生水合作用，弱化水的結(jié)晶過程使溶液的粘性增加從而少冰晶的形成，能大大降低細胞在凍存過程中冰晶對于細胞的損傷，有效提高細胞復(fù)蘇存活率。該產(chǎn)品配方成分明確，不含血清、不含動物源性蛋白，可減少各類細菌、病毒和支原體等污染，保證凍存細胞的安全；不僅適用于常規(guī)細胞系、原代細胞，同時亦適合于無血清培養(yǎng)細胞和蛋白表達細胞。

　　與傳統(tǒng)凍存液相比，無需繁瑣費時的程序凍存步驟或價格高昂的程序降溫儀，可直接重懸細胞后置于-80℃，次日轉(zhuǎn)移到液氮完成整個凍存過程，節(jié)省大量的時間和精力。

　　產(chǎn)品特點

　　1、即用型細胞凍存液，隨用隨取，2-8℃穩(wěn)定保存1年以上；

　　2、無需繁瑣的程序凍存步驟或昂貴的程序降溫儀，直接放入-80℃冰箱，節(jié)省大量的時間和精力；

　　3、細胞復(fù)蘇率高達90%以上，適用于大多數(shù)哺乳動物細胞的凍存；

　　4、不含血清，批次間差異小；

　　5、能夠有效維持干細胞的多向分化潛能；

　　6、化學(xué)成分明確，沒有添加任何外源蛋白，減少細胞污染機會，同時減少外源蛋白對細胞正常生長和分化的影響。

　　使用說明

　　(一)細胞凍存

　　1、選擇對數(shù)生長期的細胞（90%左右），并保證在凍存前24h 內(nèi)換液一次，收集細胞，并將細胞制備成單細胞懸液（貼壁細胞可能需要用胰酶消化），計數(shù)；

　　2、將細胞懸液1000r/min 離心5min，棄上清；

　　3、向細胞沉淀物中加入細胞凍存液，輕輕吹打，重懸細胞，使細胞密度達到5×10?～1×10?個/mL；

　　4、將上述細胞懸液按1ml～1.5ml 的量，分裝于無菌細胞凍存管內(nèi)，擰緊管蓋，并做好標記；

　　5、將凍存管直接置于-80℃冰箱中，24 h后移入液氮長期保存。

　　(二)細胞復(fù)蘇

　　1、從液氮罐中取出凍存的細胞，立即放入37℃水浴鍋中快速解凍(操作時切勿使水浸沒凍存管口，以免造成細胞污染)；

　　2、待細胞凍存管中凍存液*融化后，立即逐滴加入少量細胞*培養(yǎng)基于該冷凍管中與細胞進行混合，再將細胞混合液從凍存管中移入含有8～10mL該細胞*培養(yǎng)基的試管中，輕輕混合均勻；1000r/min離心5min，棄上清；

　　3、加入1～2mL*培養(yǎng)基重懸細胞，按照合適的接種密度將細胞接種到細胞培養(yǎng)容器中，加入適量的已預(yù)熱的新鮮的細胞*培養(yǎng)基；

　　4、輕輕搖晃培養(yǎng)器皿，使細胞分布均勻，靜置于37℃、飽和濕度細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

　　產(chǎn)品穩(wěn)定性及保存條件

　　1、置于2～8℃避光保存，有效期為1年；置于-20℃保存，有效期為3年；

　　2、本產(chǎn)品請于保質(zhì)期內(nèi)使用，超過保質(zhì)期，必須放棄使用；

　　3、為確保產(chǎn)品質(zhì)量，請避免反復(fù)凍融相關(guān)產(chǎn)品。

　　注意事項

　　1、凍存細胞分裝至凍存管后，應(yīng)減少在室溫/4℃存放時間，盡快移入到-80℃超低溫冰箱；

　　2、對于原代胚胎干細胞/iPS細胞/其它珍貴細胞樣本等凍存時，我們建議您在使用前，事先對所凍存的細胞進行至少為期1周的細胞凍存測試實驗，確認沒問題后再進行正式凍存；

　　3、本產(chǎn)品經(jīng)3次0.22μm過濾除菌，使用本產(chǎn)品時應(yīng)注意無菌操作，避免污染；

　　4、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作；

　　5、本產(chǎn)品僅用于科研用途，不可用于診斷、治療、臨床及其他用途。

　　以上知識僅供參考希望能幫助到您！